Jorjani Biomedicine Journal
فصلنامه علمی پژوهشی زیست پزشکی جرجانی
Jorjani Biomed J
Medical Sciences
http://goums.ac.ir/jorjanijournal
1
admin
2645-3509
10.52547/jorjanibiomedj
en
jalali
1396
2
1
gregorian
2017
5
1
5
1
online
1
fulltext
fa
بررسی پاسخ تکثیری لنفوسیتهای طحالی حاصل از تزریق پلاسمید کد کننده E7-HPV16 در مدل
موش توموری پاپیلوماویروس
Evaluation of DNA vaccine encoding HPV-16 E7 on Lymphocyte proliferation induction in Human Papilloma Virus-associated tumor animal models
پزشکی عمومى
General medicine
تحقیقی
Original article
<div style="border:none;border-bottom:double #C00000 4.5pt;padding:0cm 0cm 1.0pt 0cm;margin-right:28.55pt;margin-left:0cm;"><strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">زمینه و هدف:</span></span></strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> انکوپروتئینهای پاپیلوما ویروس، شامل </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">E7</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">E6</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> بهطور معمول در سلولهای سرطان سرویکس بیان میشوند. این پروتئینها اهداف مناسبی برای طراحی واکسنهای درمانی علیه بدخیمیهای وابسته به پاپیلوما ویروسها میباشد. هدف از انجام این مطالعه سنجش میزان پاسخ تکثیری لنفوسیت های طحالی حاصل از تزریق پلاسمید کد کننده </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">E7-HPV16</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> بر روی مدل موش توموری پاپیلوما ویروس بود.</span></span><br>
<strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">روش بررسی:</span></span></strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> پس از تکثیر و استخراج </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">DNA</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> واکسن </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">E7-HPV16</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">، موشهای </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">C57BL/6</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> با تزریق سلولهای </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">TC-1</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> به تعداد 2×105 سلول، توموری شدند و سپس با </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">DNA</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> واکسن </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">E7-HPV16</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> در 3 نوبت و با فواصل زمانی دو هفتهای به روش زیر پوستی واکسینه شدند و پاسخ تکثیری سلولهای طحالی به روش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">MTT</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> ارزیابی شد. همچنین میزان بیان اینترلوکین-12 در بافت تومور به کمک الایزا تعیین و میزان رشد تومور توسط کولیس به مدت 6 هفته بررسی شد.</span></span><br>
<strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">یافته ها:</span></span></strong> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">به دنبال بکار گیری </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">DNA</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> واکسن واجد ژن</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">درمانی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">E7</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12pt;">، </span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">پاسخهای تکثیری </span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">لنفوسیتهای</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">طحالی تحریک شده و به طور معنی داری نسبت به تحریک ایجاد شده در گروه کنترل بیشتر بود (05/0</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">P<</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">). </span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">همچنین</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">بررسی</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">اینترلوکین</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">-12</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">نشان</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">داد</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">که</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> مقدار</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> ترشح</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">این سایتوکاین</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">در بافت تومور موش واکسینه شده، به طور معنی داری افزایش یافت (05/0</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">P<</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">). رشد تومور در گروه واکسینه شده با </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">DNA</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> واکسن </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">HPV16</span></span><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">-</span></span> <span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">E7</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">در مقایسه با گروههای </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">PBS</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> و</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">pcDNA3</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">، کاهش معنی داری (05/0</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">P<</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">) داشت.</span></span><br>
<strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">نتیجه گیری:</span></span></strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> این پژوهش نشان میدهد که بکار گیری </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">DNA</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> واکسن حاوی ژن </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">E7</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> در مدل موش توموری می تواند به عنوان راهکاری برای القای پاسخ ایمنی سلولی ضد تومور میباشد.</span></span></div>
<div><strong>Background & Objective:</strong> Human papillomavirus (HPV) oncoproteins, including E6 and E7 are constitutively expressed in cervical cancer cells. These proteins are ideal targets to be used for developing therapeutic vaccines against existing HPV-associated carcinomas. The aim of this study was to measure the proliferation response rate of splenic lymphocytes derived from E7-HPV16 encoding plasmid injection on the tumor mouse model of papillomavirus.<br>
<strong>Method</strong>: C57BL/6 mice were inoculated subcutaneous with 5× 10⁵ TC-1 cells in three times with two weeks intervals and then immunized with HPV-16 E7 DNA vaccine. The proliferation response of splenic cells was measured by MTT assay. IL12 cytokine was measured by ELISA assay and the mass of tumor was calculated with caliper for six weeks.<br>
<strong>Results:</strong> Following the application of DNA vaccines containing E7 therapeutic gene, the proliferative response of splenic cells was provoked significanltly higher than the stimulation in control group (P<0.05). Moreover, the secretion of IL12 was significantly increased in vaccinated mice tumor tissue (P<0.05). The growth of tumor in vaccinated group was markedly decreased in comparison to PBS and pcDNA3 groups (P<0.05).<br>
<strong>Conclusion:</strong> Our findings revealed that the application of DNA vaccine containing E7 gene in a tumor mouse model may induce anti-tumor cellular immune responses.</div>
DNA واکسن, مدل موش توموری پاپیلوماویروس, پاسخ تکثیری لنفوسیتهای CD4, پاپیلوماویروس
DNA vaccine, Papillomavirus tumor model, Lymphocyte proliferation assay, HPV
14
24
http://goums.ac.ir/jorjanijournal/browse.php?a_code=A-10-24-97&slc_lang=fa&sid=1
Sanaz
BaghbanRahimi
ساناز
باغبان رحیمی
10031947532846002565
10031947532846002565
No
Department of Microbiology, Golestan University of Medical Sciences, Gorgan, Iran
دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گلستان، گرگان، ایران
Hoorieh
Soleimanjahi
حوریه
سلیمان جاهی
10031947532846002566
10031947532846002566
No
Department of Virology, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
گروه ویروس شناسی پزشکی
Alireza
Mohebbi
علیرضا
محبی
10031947532846002567
10031947532846002567
No
Department of Microbiology, Golestan University of Medical Sciences, Gorgan, Iran.
دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گلستان، گرگان، ایران
Mir Saeid
Ebrahimzadeh
میرسعید
ابراهیم زاده
10031947532846002568
10031947532846002568
No
Department of Microbiology, Golestan University of Medical Sciences, Gorgan, Iran.
دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گلستان، گرگان، ایران
Leyla
Alizade
لیلا
علیزاده
10031947532846002569
10031947532846002569
No
Shefa Neuroscience Research Center, Khatam Al-Anbiya Hospital, Tehran, Iran
مرکز تحقیقات علوم اعصاب شفا، بیمارستان خاتم انبیا، تهران، ایران.
Amir
Ghaemi
امیر
قائمی
Ghaem_amir@yahoo.com
10031947532846002570
10031947532846002570
Yes
Department of Microbiology, Golestan University of Medical Sciences, Gorgan, Iran
مرکز تحقیقات بیماریهای عفونی، گروه میکروب شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گلستان، گرگان، ایران