fa مشخصه‌سازی پروتئین‌ نوترکیب فاکتور محرک گرانولوسیتی (G-CSF) با استفاده از محاسبه ضریب خاموشی پزشکی عمومى General medicine تحقیقی Original article <p dir="RTL"><strong>زمینه و هدف:</strong> ضریب خاموشی (<span dir="LTR">Extinction </span><span dir="LTR">Coefficient</span>) ، عددی است که برای هر پروتئین منحصر به فرد است و با محاسبه آن می توان نوع و خلوص پروتئین نوترکیب تولید شده در آزمایشگاه ها یا کارخانجات تولیدکننده پروتئین های نوترکیب را ارزیابی نمود. در این مطالعه روشی ساده برای محاسبه ضریب خاموشی پروتئین نوترکیب فاکتور محرک گرانولوسیتی <span dir="LTR">(G-CSF)</span> ارائه می گردد.</p> <p dir="RTL"><strong>روش بررسی:</strong> پروتئین<span dir="LTR">(G-CSF)</span> با غلظت <span dir="LTR">mg/ml</span> 5/0 از آریا تینا ژن تهیه شد. ابتدا روش الکتروفورز در ژل پلی آکریل آمید سدیم دودسیل سولفات برای بررسی میزان خلوص پروتئین به کار رفت، سپس رقت های سریالی &nbsp;الی &nbsp;از پروتئین تهیه شد و با استفاده از طیف سنجی فرابنفش- مرئی میزان جذب نوری آن ها اندازه گیری شد.</p> <p dir="RTL"><strong>یافته</strong> <strong>ها:</strong>&nbsp; نتیجه الکتروفورز به صورت تک باندی حدود 18 کیلو دالتون به دست آمد. نتایج حاصل از طیف سنجی فرابنفش- مرئی هر یک از رقت های سریالی به صورت اسپکتروگرام هایی مجزا رسم شد و از آن ها برای رسم منحنی خطی رگرسیون غلظت های استاندارد پروتئین نوترکیب فاکتور محرک گرانولوسیتی <span dir="LTR">(G-CSF)</span> استفاده شد.</p> <p dir="RTL"><strong>نتیجه&shy;گیری: </strong>نتایج بدست آمده در این مطالعه ضریب خاموشی معادل با <span dir="LTR">M^-1 cm^-1</span>&nbsp; 81/0 را برای پروتئین نوترکیب فاکتور محرک گرانولوسیتی <span dir="LTR">(G-CSF)</span> نشان می&shy;دهد که مطابق عدد جهانی گزارش شده توسط تولیدکنندگان بین&shy;المللی این پروتئین و حاکی از درستی روش به کار رفته برای محاسبه این پارامتر فیزیکوشیمیایی است.</p> <div> <p><strong>Background and Objective</strong>: <em>Extinction coefficient</em> is the unique value to each protein and can evaluate the type and purity of recombinant protein produced in laboratories and factories producing recombinant proteins. In this study, a simple method for calculating the extinction coefficient of recombinant protein Granulocyte-Colony Stimulating Factor (<strong>G-CSF</strong>) is presented.</p> <p><strong>Methods</strong>: G-CSF with concentration of 0.5 mg/ml was prepared from Arya Tina Gene. Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) method was used to check the purity of the protein, then serial dilutions of 1/2 to 1/64 of the protein were prepared and using UV-VIS spectroscopy the optical density was measured.</p> <p><strong>Results</strong>: Electrophoresis result as a single band of 18 kDa was observed. The results of UV-VIS spectroscopy of serial dilution were plotted as a distinct spectrograms and these were used to plot linear regression curve of the standard concentration of G-CSF.</p> <p><strong>Conclusion</strong>: The results of this study shows the extinction coefficient equal to 0.81 M^-1 cm^-1for recombinant G-CSF that was accordant with the number reports by international producers of G-CSF and suggests the correct method is used to calculate the physicochemical parameter.</p> </div> ضریب خاموشی, طیف‌سنجی فرابنفش‌-‌ مرئی, پروتئین نوترکیب فاکتور محرک گرانولوسیتی (G-CSF), الکتروفورز در ژل پلی-آکریل‌آمید سدیم دودسیل سولفات (SDS-PAGE) Extinction coefficient (), UV-VIS Spectroscopy, Recombinant Granulocyte-Colony stimulating Factor (G-CSF), sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) 89 96 http://goums.ac.ir/jorjanijournal/browse.php?a_code=A-10-24-77&slc_lang=fa&sid=1 Fariba Bagherieh فریبا باقریه 10031947532846004233 10031947532846004233 Yes golestan medical univercity دانشگاه علوم پزشکی گلستان